來源：西安海研生物科技公司 發(fā)布時(shí)間：2019-03-30
目前我國對生活飲用水進(jìn)行衛(wèi)生學(xué)評價(jià) ,檢測的微生物指標(biāo)主要有大腸菌群、耐熱大腸菌群、大腸埃希菌 ,這類指標(biāo)是糞便污染的指示菌。傳統(tǒng)方法為多管發(fā)酵法 ,其檢測周期較長 ,需 2 ～5 d,陽性結(jié)果需驗(yàn)證試驗(yàn) ,使得實(shí)驗(yàn)操作步驟較為繁瑣 ,不能對生活飲用水的衛(wèi)生學(xué)狀況做出快速評價(jià) ,特別是在抗震救災(zāi)特殊時(shí)期 ,如能實(shí)現(xiàn)微生物指標(biāo)的實(shí)時(shí)監(jiān)測 ,將地支持抗震救災(zāi)工作的順利實(shí)施 ,有力保障廣大災(zāi)區(qū)人民群眾生活飲用水的供水安全。因此 , 酶底物法作為一種快檢方法 ,其快速簡便的特點(diǎn)可以較好的彌補(bǔ)傳統(tǒng)方法的不足。
酶底物法 （ enzyme substrate technique）的原理是 :利用大腸菌群細(xì)菌能產(chǎn)生β2半乳糖苷酶 （β2D2galactosidase）分解 ON 2PG （O rtho2 nitrophenyl2β2D2galactopyranoside ） 使培養(yǎng)液呈黃色 ,檢測水樣中是否含有大腸菌群。利用大腸埃希菌產(chǎn)生 β2葡萄 糖 醛 酸 酶 （ β2glucuronidase ） 分 解 MUG （ 42 methyl2umbelliferyl2β2D2glucuronide）使培養(yǎng)液在波長 366 nm紫外光下產(chǎn)生藍(lán)色熒光 , 檢測水樣中是否含有大腸埃希菌。酶底物法有商品化試劑供應(yīng) ,實(shí)驗(yàn)操作簡便 ,無需確認(rèn)試驗(yàn) ,可同時(shí)檢測水樣中大腸菌群和大腸埃希菌。如果改變培養(yǎng)溫度 ,還可檢測耐熱大腸菌群。該方法檢測周期短 , 18 ～24 h 即可報(bào)告結(jié)果。可見該方法大的特點(diǎn)是節(jié)省了時(shí)間和人力。
酶底物法應(yīng)用的優(yōu)勢：
精確可信
使用MPN法進(jìn)行定量檢測，可直接檢測100毫升水揚(yáng)中0-2419MPN目標(biāo)細(xì)菌
精確檢出100ml水樣中單個(gè)的活性大腸桿菌群和大腸埃希氏菌，假陰性低
每個(gè)單位試劑可抑制上百萬個(gè)異養(yǎng)細(xì)菌，假陰性低
無需驗(yàn)證，精確性高于濾膜法及多管發(fā)酵法
符合標(biāo)準(zhǔn)GB/T5750.12-2006《生活飲用水檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)》
簡單快捷
檢測時(shí)間不超過24小時(shí)，無需驗(yàn)證試驗(yàn)
簡單培訓(xùn)就能輕松使用，手工操作少于一分鐘
不會(huì)因?yàn)檫^濾阻塞（濾膜法）或異養(yǎng)細(xì)胞的干擾（多管發(fā)酵法）而產(chǎn)生數(shù)據(jù)誤差
無需玻璃器皿清洗及菌落計(jì)數(shù)，減輕實(shí)驗(yàn)人員工作量
適用于大量樣品的批量快速檢測
酶底物法的主要缺點(diǎn)
培養(yǎng)基成分復(fù)雜 ,實(shí)驗(yàn)室配制困難 ,目前只有進(jìn)口試劑可供選擇 ,使得檢測成本大為提高。如果能實(shí)現(xiàn)試劑的國產(chǎn)化 ,相信其應(yīng)用會(huì)得到推廣。
對于污染比較嚴(yán)重的生活飲用水 ,酶底物法的定量檢測能力不如多管發(fā)酵法。遇到這類情況時(shí)如需應(yīng)用酶底物法 ,則只能先將水樣適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行檢測。
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